非洲豬瘟的環(huán)境監測

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  • 日期: 2019-07-25
  • 來(lái)源: 防疫一線(xiàn)

文丨王章權

監測是防控動(dòng)物疫病的基礎,是制定防控建設的一級依據。當前非洲豬瘟疫情嚴峻,通過(guò)進(jìn)行豬場(chǎng)環(huán)境的監測,可以及時(shí)發(fā)現非洲豬瘟疫情隱患,有效切斷病原傳播途徑,為非洲豬瘟防控決策提供科學(xué)依據。

非洲豬瘟病毒,具有龐大而復雜的基因組,擁有超強的體外生存能力,雖然宿主單一,只感染豬和野豬,但傳播源和傳播途徑都十分復雜。因為非洲豬瘟病毒的這些特點(diǎn),導致非洲豬瘟的防控工作實(shí)施難度大。

能否在感染之前,及時(shí)地把非洲豬瘟病毒“揪”出來(lái),是能否有效避免非洲豬瘟病毒侵害的關(guān)鍵之一。在復產(chǎn)方面,豬場(chǎng)能否成功,清場(chǎng)后是否做到全面凈化非洲豬瘟病毒,必須通過(guò)全面的環(huán)境監測來(lái)驗證。

可能受到污染的環(huán)境

非洲豬瘟病毒是唯一的蟲(chóng)媒DNA病毒,可在鈍緣軟蜱中增殖,并使其成為主要的傳播媒介。同時(shí),它還可通過(guò)車(chē)、水源、料槽、去勢、器具、軟蜱叮咬等經(jīng)口和呼吸道途徑間接傳播。

發(fā)病豬和帶毒豬是非洲豬瘟病毒的主要傳染源, 病豬各組織器官、體液、各種分泌物、排泄物中均含有高滴度的病毒, 因此病豬的唾液、鼻分泌物、淚液、尿液、糞便、生殖道分泌物以及破潰的皮膚、病豬血液等為主要的傳染源。

非洲豬瘟病毒在環(huán)境中較為穩定,在空氣中能保持活性數日,在血液、糞便和組織中可長(cháng)期存活,凍肉中存活數年至數十年,未熟肉品、腌肉、泔水中可長(cháng)時(shí)間存活。病毒具有明顯耐冷不耐熱的特點(diǎn),低溫暗室內存在血液中之病毒可生存六年,室溫中也可存活數周。

非洲豬瘟病毒檢測

2019年4月,農業(yè)農村部發(fā)布《關(guān)于加強養殖環(huán)節非洲豬瘟疫情排查的通知》,鼓勵規模豬場(chǎng)和種豬場(chǎng)開(kāi)展非洲豬瘟自檢,F階段主流檢測手段有三種:熒光定量PCR檢測、核酸等溫擴增類(lèi)和快速檢測試紙條。

1.熒光定量PCR檢測

熒光定量PCR檢測的優(yōu)點(diǎn)明顯,敏感度高、準確率高,可用于環(huán)境樣本的檢測,也可多樣品混合檢測。但是同時(shí)其缺點(diǎn)也明顯,操作復雜、成本高,需要配備專(zhuān)業(yè)人士和專(zhuān)業(yè)設備,花費時(shí)間也比較長(cháng),單個(gè)樣本的檢測時(shí)間超過(guò)一個(gè)小時(shí)。如果操作失誤,對檢測結果影響大,同時(shí)有可能造成檢測實(shí)驗室污染。
由于熒光定量PCR檢測設備條件的限制,一般只鼓勵具備一定規模的豬場(chǎng)配置,進(jìn)行日常篩查工作。農業(yè)農村部也鼓勵規模豬場(chǎng)、種豬場(chǎng)配置檢測儀器設備,規范使用經(jīng)農業(yè)農村部批準或經(jīng)中國動(dòng)物疫病預防控制中心比對符合要求的檢測方法,自行開(kāi)展非洲豬瘟檢測,提高排查工作的針對性和有效性。

2.核酸等溫擴增技術(shù)

核酸等溫擴增技術(shù)是一類(lèi)核酸體外擴增技術(shù),其反應過(guò)程始終維持在恒定的溫度下,通過(guò)添加不同活性的酶和各自特異性引物來(lái)達到快速核酸擴增的目的。
核酸等溫擴增技術(shù)是近幾年來(lái)興起,能在某一特定的溫度下擴增特定的DNA或者RNA。與傳統PCR技術(shù)相比,由于不需要升溫降溫,能夠在恒定溫度下實(shí)現擴增,對儀器的要求大大簡(jiǎn)化,反應時(shí)間大大縮短,更能滿(mǎn)足快速簡(jiǎn)便的需求,具有特異性高、分析速度快、成本低、突變率低的優(yōu)勢。
由于這項技術(shù)所具備的優(yōu)勢,可以實(shí)現便攜式的快速核酸檢測,在非洲豬瘟形勢下無(wú)疑更有利于不具備構建規范實(shí)驗室條件的豬場(chǎng)檢測非洲豬瘟。

3.快速檢測試紙條

快速檢測試紙條操作簡(jiǎn)單,成本低,無(wú)需配備價(jià)格昂貴的設備,但是準確性不及熒光定量PCR檢測,同時(shí)一般只適合用于全血或內臟組織等的檢測,需要注意采樣對象和方法。

快速檢測試紙條適合用于豬場(chǎng)進(jìn)行初步篩查,一般進(jìn)行多次采樣檢測,一旦檢測到非洲豬瘟病毒陽(yáng)性,要及早處理懷疑病豬,并盡早將樣本送到實(shí)驗室進(jìn)行確診。

豬場(chǎng)非洲豬瘟病毒監測

為及早進(jìn)行對非洲豬瘟病毒的篩查,避免豬場(chǎng)豬只受到病毒感染,豬場(chǎng)需要對豬場(chǎng)環(huán)境進(jìn)行監測。

針對容易接觸到豬場(chǎng)外部環(huán)境的地方,如豬場(chǎng)大門(mén)口、運豬臺、人員進(jìn)出通道等,需要經(jīng)常性消毒,有條件的豬場(chǎng),定期抽取環(huán)境樣本進(jìn)行熒光定量PCR檢測。
一般豬場(chǎng)可以利用快速檢測試紙條,定期對場(chǎng)內豬只進(jìn)行抽查,有異常狀況,迅速進(jìn)行針對性監測。

懷疑發(fā)病,可采集懷疑病豬的血清樣品和病原學(xué)樣品,病原學(xué)樣品主要包括抗凝血、脾臟、扁桃體、淋巴結、腎臟和骨髓等。如環(huán)境中存在鈍緣軟蜱,也應一并采集。
樣品的包裝和運輸應符合農業(yè)農村部《高致病性動(dòng)物病原微生物菌(毒)種或者樣本運輸包裝規范》等規定。規范填寫(xiě)采樣登記表,采集的樣品應在冷藏密封狀態(tài)下運輸到相關(guān)實(shí)驗室。

取樣應小心謹慎,并按照適當的方法避免對動(dòng)物造成過(guò)度的應激或傷害,或對采樣人員造成傷害。應無(wú)菌收集并注意避免交叉污染,并始終使用新的針頭以避免疫病傳播。所有等待檢測的樣品都應該被認為有感染性并應進(jìn)行相應處理。

根據農業(yè)農村部要求,經(jīng)養豬場(chǎng)戶(hù)自行檢測或獸醫社會(huì )化服務(wù)機構受委托檢測為疑似非洲豬瘟病毒核酸陽(yáng)性的,應當依法報告當地畜牧獸醫部門(mén),并按要求規范做好樣品送檢和確診。在樣品確診前,養豬場(chǎng)戶(hù)要嚴格做好生豬隔離和風(fēng)險物品管理,不得擅自處置。

已清場(chǎng)的豬場(chǎng),如果準備復養,必須首先做好全面消毒,然后多處多點(diǎn)抽取環(huán)境樣本送往實(shí)驗室,通過(guò)熒光定量PCR檢測樣本,確認樣本無(wú)病毒存在,再引入哨兵豬進(jìn)行觀(guān)察。哨兵豬飼養不低于45天,而且不得調出。最后對哨兵豬進(jìn)行血清學(xué)和病原學(xué)檢測,確認非洲豬瘟病毒陰性,且觀(guān)察期間沒(méi)有臨床異常,養殖場(chǎng)才能進(jìn)行補欄復產(chǎn)。