非洲豬瘟的防控

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  • 日期: 2018-10-29
  • 來(lái)源: 防疫一線(xiàn)

非洲豬瘟(簡(jiǎn)稱(chēng)ASF)是由非洲豬瘟病毒感染引起的豬的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病, 嚴重危害著(zhù)全球養豬業(yè)。是世界動(dòng)物衛生組織(OIE)法定報告的動(dòng)物疫病,我國將其列為一類(lèi)動(dòng)物疫病。

1、我國疫情發(fā)生情況(注:截至發(fā)稿日數據)

2018年8月3日,一則我國發(fā)生非洲豬瘟的消息傳遍了整個(gè)養豬界。8月3日上午11時(shí),我國在遼寧省沈陽(yáng)市沈北新區確診并報道了首例非洲豬瘟疫情。根據農業(yè)農村部通報,8月1日,遼寧省沈陽(yáng)市沈北新區某養殖戶(hù)的生豬發(fā)生疑似非洲豬瘟疫情,存欄383頭,發(fā)病47頭,死亡47頭。農業(yè)農村部接到報告后立即緊急指導當地做好各項防治工作,并采樣檢測,啟動(dòng)了Ⅱ級疫情預警,沈北新區政府立即發(fā)布封鎖令,劃定疫點(diǎn)、疫區和受威脅區,設立8個(gè)臨時(shí)消毒檢查站,連夜對疫點(diǎn)、疫區內所有存欄生豬進(jìn)行撲殺和無(wú)害化處理,對疫點(diǎn)、疫區和受威脅區進(jìn)行全面徹底消毒。

8月16日下午出現第二例疫情,經(jīng)中國動(dòng)物衛生與流行病學(xué)中心檢測確認,鄭州雙匯食品有限公司屠宰場(chǎng)從黑龍江佳木斯湯原縣鵲立鎮交易市場(chǎng)運到的260頭生豬中,有30頭死亡為非洲豬瘟疫情。自2018年8月16日起,鄭州雙匯食品有限公司屠宰場(chǎng)劃定為疫點(diǎn)實(shí)施封鎖,時(shí)間為6周。但在17日20時(shí),黑龍江省政府召開(kāi)了關(guān)于非洲豬瘟疫情緊急發(fā)布會(huì ),佳木斯市政府通報了關(guān)于疑似該市調出生豬檢出非洲豬瘟的有關(guān)情況。經(jīng)哈獸研采樣檢測結果表明:佳木斯養豬場(chǎng)不存在非洲豬瘟,也不支持該養豬場(chǎng)為河南省某屠宰場(chǎng)非洲豬瘟疫情的疫源地。

農業(yè)農村部新聞辦公室8月19日發(fā)布,江蘇省連云港市海州區發(fā)生一起生豬非洲豬瘟疫情。已啟動(dòng)應急機制,采取封鎖撲殺、無(wú)害化處理、消毒等處置措施,禁止所有生豬及易感動(dòng)物和產(chǎn)品運入或流出封鎖區。

8月22日下午3點(diǎn),經(jīng)中國動(dòng)物衛生與流行病學(xué)中心確診,浙江省樂(lè )清市淡溪鎮樟岙村股份經(jīng)濟合作社畜牧養殖小區發(fā)生非洲豬瘟疫情。

基因測序結果顯示,引起我國本次非洲豬瘟疫情的毒株為基因II型,部分基因序列與格魯吉亞2007株和俄羅斯伊爾庫茨克2017株的相應序列完全一致。

這次沈陽(yáng)市發(fā)生的非洲豬瘟疫情,是我國首次發(fā)現的疫情。疫情發(fā)生后,國務(wù)院和農業(yè)農村部高度重視,要求堅決防止疫情蔓延擴散。

2、非洲豬瘟的流行歷史與分布

1921年,東非國家肯尼亞首次確認非洲豬瘟疫情。之后,于1957年傳入歐洲,1971年傳入美洲,2007年,首次傳播至歐亞接壤的格魯吉亞,迅速傳入俄羅斯。2012年,傳入烏克蘭,2013年傳入白俄羅斯。2014年傳入波蘭、立陶宛、拉脫維亞、愛(ài)沙尼亞,2016年傳入摩爾多瓦,2017年傳入捷克,羅馬尼亞。2018年8月傳入我國遼寧。據統計, 截止到2015年, 全球約有52個(gè)國家發(fā)生過(guò)非洲豬瘟疫情或檢測到病毒, 其中包括31個(gè)非洲國家、17個(gè)歐洲國家和4個(gè)拉丁美洲國家。2016年共有10個(gè)國家的多個(gè)地區發(fā)生非洲豬瘟疫情。根據OIE通報, 截止2017年10月底, 全球共有11個(gè)國家 (波蘭、拉脫維亞、立陶宛、烏克蘭、俄羅斯、捷克、贊比亞、南非、摩爾多瓦、羅馬尼亞、科特迪瓦) 發(fā)生非洲豬瘟疫情。其中波蘭疫情數高達470多起。2018年俄羅斯世界杯在11個(gè)舉辦城市中,在舉辦前的6個(gè)月有3個(gè)城市周邊發(fā)生了14起疫情。在世界杯開(kāi)始后不到2個(gè)月時(shí)間,就有6個(gè)城市周邊發(fā)生了38起疫情,占俄羅斯全國同期疫情總數的76%。

3、病原

國際病毒分類(lèi)委員會(huì ) (ICTV) 最新病毒分類(lèi)第八次報告中指出, 非洲豬瘟病毒屬于DNA病毒目, 非洲豬瘟病毒科, 非洲豬瘟病毒屬成員,病毒有些特性類(lèi)似虹彩病毒科和痘病毒科。病毒粒子的直徑為175~215納米,呈20面體對稱(chēng),有囊膜;蚪M為雙股線(xiàn)狀DNA,大小170~190kb。含有151個(gè)開(kāi)放閱讀框, 可編碼150~200種蛋白。在豬體內,非洲豬瘟病毒可分為23個(gè)基因型。非洲豬瘟病毒基因組變異頻繁, 表現出明顯的遺傳多樣性。非洲豬瘟病毒不能夠誘導產(chǎn)生中和抗體,因此還沒(méi)有對血清型進(jìn)行分類(lèi)。非洲豬瘟病毒可在幾種類(lèi)型的細胞漿中,尤其是網(wǎng)狀內皮細胞和單核巨噬細胞中復制。該病毒可在鈍緣蜱中增殖,并使其成為主要的傳播媒介。

該病毒為囊膜病毒, 能夠抵抗蛋白酶的作用, 對乙醚及氯仿等脂溶劑敏感, 但易被胰酶滅活。病毒在p H 4~10的溶液中比較穩定, 但對溫度較敏感, 病毒可在5℃的血清中存活6年, 室溫中可活數周,56℃加熱70min或60℃加熱30min可使其滅活。許多脂溶劑和消毒劑可以將其破壞。本病毒能從被感染豬之血液、組織液、內臟,及其他排泄物中證實(shí)出來(lái)。

4、流行病學(xué)

易感動(dòng)物:豬是非洲豬瘟病毒唯一的自然宿主,豬與野豬對本病毒都系自然易感性的,各品種及各不同年齡之豬群同樣是易感性,其他動(dòng)物不感染該病毒,人工感染白鼠、天竺鼠、兔、貓、犬、山羊、綿羊、牛、馬和鴿等動(dòng)物均未獲成功。

傳播媒介:非洲豬瘟病毒是唯一的蟲(chóng)媒DNA病毒,幾種軟蜱是非洲豬瘟病毒的貯藏宿主和媒介。因此, 在非洲, 非洲豬瘟病毒在蜱和野豬感染圈中長(cháng)期存在, 難以根除。一般認為,非洲豬瘟病毒傳入無(wú)疫地區都與來(lái)自國際機場(chǎng)和港口的未經(jīng)煮過(guò)的感染豬制品或殘羹喂豬有關(guān),或由于接觸了感染的家豬的污染物,胎兒,糞便,病豬組織,并喂了污染飼料而發(fā)生。發(fā)病率和死亡率最高可達100%。

5、臨床癥狀

自然感染潛伏期4~19d,往往更短,臨床實(shí)驗感染則為2~5d。非洲野豬對該病有較強的抵抗力, 一般不表現出臨床癥狀, 但家豬和歐洲野豬一旦感染, 則表現出明顯的臨床癥狀。根據病毒的毒力、感染劑量和感染途徑的不同, 臨床癥狀存在差異,可表現為最急性、急性、亞急性或隱性感染。

發(fā)病時(shí)體溫升高至41℃,約持續4d,直到死前48h,體溫始下降為其特征,同時(shí)臨床癥狀直到體溫下降才顯示出來(lái),故與豬瘟體溫升高時(shí)癥狀出現不同,最初3~4d發(fā)熱期間,豬只之食欲,顯出極度脆弱,豬只躺在舍角,強迫趕起要它走動(dòng),則顯示出極度累弱,尤其後肢更甚,脈搏動(dòng)快,咳嗽,呼吸快約三分之一,顯呼吸困難,漿液或粘液膿性結膜炎,有些毒株會(huì )引起帶血之下痢,嘔吐,血液變化似豬瘟,從3~5個(gè)病例中,顯示有50%之白血球數減少現象,淋巴球也同樣減少,體溫升高時(shí)發(fā)生白血球性貧血,至第4d白血球數便降至40%才不下降,未成熟中性球數增加也可觀(guān)察到,往往發(fā)熱後第7天死亡,或癥狀出現僅1~2天便死亡。

5.1最急性病例:

在發(fā)病幾天內即死亡(少于1周)。病豬發(fā)熱,成堆擁擠在一起,除此之外,無(wú)其它明顯臨床癥狀。

5.2急性病例:

感染后最初癥狀是高燒(>40℃)伴隨沉郁和食欲下降,并且耳部、腹部和腿部皮膚發(fā)紅,四肢末端、腹部、口鼻部和耳朵等處出現紅疹、嘔吐、發(fā)熱、虛脫、鼻子或直腸出血、出血性休克(鼻分泌物、腹瀉),死前表現呼吸困難(肺水腫造成)。感染后2~10d死亡,流產(chǎn)也是比較常見(jiàn)的癥狀。血液學(xué)檢測會(huì )出現白細胞和淋巴細胞減少等。臨床癥狀出現后7~10d內發(fā)生死亡, 死亡率高, 可達100%。

5.3亞急性病例:

臨床癥狀不明顯,病毒造成血小板減少癥,在感染后20d左右死亡。發(fā)病豬的淋巴結出血癥狀明顯,同時(shí)肺臟、腎臟、心臟及胃部也有病變和出血癥狀。

亞急性或慢性非洲豬瘟多發(fā)生在非洲以外的地區, 表現為妊娠母豬流產(chǎn), 呼吸改變, 關(guān)節腫大, 跛行, 皮膚潰瘍, 消瘦, 病死率低。

6、發(fā)病機理

非洲豬瘟病毒可經(jīng)過(guò)口和上呼吸道系統進(jìn)入豬體,在鼻咽部或是扁桃體發(fā)生感染,病毒在扁桃體和下頜淋巴結的單核細胞和巨噬細胞中進(jìn)行復制,通過(guò)淋巴和血液遍布全身,在淋巴結、骨髓、脾、肺、肝和腎等進(jìn)行第二次復制。病毒血癥通常在感染后4~8d出現,由于缺乏中和抗體,將持續數周或數月。強毒感染時(shí)細胞變化較快,在呈現明顯的刺激反應前,細胞都已死亡。弱毒感染時(shí),刺激反應很容易觀(guān)察到,細胞核變大,普遍發(fā)生有絲分裂。發(fā)病率通常在40%~85%之間,死亡率因感染的毒株不同而有所差異。高致病性毒株死亡率可高達90~100%;中等致病性毒株在成年動(dòng)物的死亡率在20%~40%之間,在幼年動(dòng)物的死亡率在70%~80%之間;低致病性毒株死亡率在10%~30%之間。

7、病理變化

在耳、鼻、腋下、鶥腹、會(huì )陰、尾和腳無(wú)毛部分呈界線(xiàn)明顯的紫色斑,耳朵紫斑部分常腫脹,中心深暗色分散性出血,邊緣褪色,尤其在腿及腹壁皮膚肉眼可見(jiàn)到。內臟器官廣泛性出血。脾臟腫大、梗死, 呈暗黑色, 質(zhì)地脆弱。淋巴結腫大、出血, 暗紅色血腫, 切面呈大理石樣。腎臟表面及皮質(zhì)有點(diǎn)狀出血。切開(kāi)胸腹腔、心包、胸膜和腹膜上有許多澄清、黃或帶血色液體,心內膜及漿膜可見(jiàn)斑點(diǎn)狀出血。在腹部?jì)扰K或腸系膜上表部分,小血管受到影響更甚,于內臟漿液膜可見(jiàn)到棕色轉變成淺紅色之瘀斑,尤其于小腸更多,直腸壁深處有暗色出血現象。

8、診斷

8.1臨診診斷

非洲豬瘟與豬瘟等其他出血性疾病的癥狀和病變都很相似,比如, 豬瘟、高致病性藍耳病、豬丹毒和敗血性沙門(mén)菌等;另外非洲豬瘟的亞急性型和慢性型在生產(chǎn)現場(chǎng)實(shí)際上是難以區別的,因而不能根據臨床癥狀和眼觀(guān)病變來(lái)判斷是否為非洲豬瘟,必須用實(shí)驗室方法才能鑒別。

8.2實(shí)驗室診斷

非洲豬瘟的實(shí)驗室診斷主要有酶聯(lián)免疫吸附試驗 (ELISA) 、PCR、熒光定量PCR、DNA原位雜交、免疫組織化學(xué)檢測、病毒分離及動(dòng)物接種等多種方法,另外,一些新的方法正在被開(kāi)發(fā)和評估,但到目前為止,生產(chǎn)實(shí)際中,應用較多的還是Elisa、PCR以及熒光定量PCR等常用方法:

8.2.1  酶聯(lián)免疫吸附試驗 (ELISA):OIE將ELISA作為診斷非洲豬瘟的首選血清學(xué)方法,應用于血清抗體的檢測, 具有操作方便、特異性較好、靈敏度高的特點(diǎn), 適用于大批量樣品的檢測, 國內外常用作檢測抗原的蛋白有VP73、VP72、P54、P32和P30等。目前檢測抗體的商品試劑盒有ELISA K3、ELISA ID-VET和ELISA-Svanova,但由于我國之前無(wú)非洲豬瘟病例,所以尚無(wú)批準注冊的非洲豬瘟診斷試劑。

8.2.2 PCR:具有簡(jiǎn)單快速、靈敏度高和特異性強的優(yōu)點(diǎn), 是目前非洲豬瘟病毒最常用的實(shí)驗室檢測方法?梢詸z測出極低含量的非洲豬瘟病毒, 為早期感染的快速診斷提供了有效的分子生物學(xué)檢測方法。多重RT-PCR方法, 還能夠鑒別診斷豬瘟病毒和非洲豬瘟病毒, 可以從臨床樣品 (如抗凝全血、細胞培養物和組織) 中檢測到病毒, 這為早期快速、特異性診斷非洲豬瘟和豬瘟提供了可靠的方法。

8.2.3 熒光定量PCR:實(shí)時(shí)熒光定量PCR比常規PCR具有更高的敏感性和特異性, 可同時(shí)快速檢測大批量樣品。

8.3農業(yè)農村部在《非洲豬瘟防治技術(shù)規范(試行)》中規定:

血清學(xué)檢測:抗體檢測可采用間接酶聯(lián)免疫吸附試驗、阻斷酶聯(lián)免疫吸附試驗和間接熒光抗體試驗等方法。

血清學(xué)檢測應在符合相關(guān)生物安全要求的省級動(dòng)物疫病預防控制機構實(shí)驗室、中國動(dòng)物衛生與流行病學(xué)中心(國家外來(lái)動(dòng)物疫病研究中心)或農業(yè)部指定實(shí)驗室進(jìn)行。

病原學(xué)檢測:病原學(xué)快速檢測可采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗、聚合酶鏈式反應和實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈式反應等方法。

開(kāi)展病原學(xué)快速檢測的樣品必須滅活,檢測工作應在符合相關(guān)生物安全要求的省級動(dòng)物疫病預防控制機構實(shí)驗室、中國動(dòng)物衛生與流行病學(xué)中心(國家外來(lái)動(dòng)物疫病研究中心)或農業(yè)農村部指定實(shí)驗室進(jìn)行。

病毒分離鑒定:可采用細胞培養、動(dòng)物回歸試驗等方法。

病毒分離鑒定工作應在中國動(dòng)物衛生與流行病學(xué)中心(國家外來(lái)動(dòng)物疫病研究中心)或農業(yè)部指定實(shí)驗室進(jìn)行,實(shí)驗室生物安全水平必須達到BSL–3或ABSL–3。

目前農業(yè)農村部確定,必須按照中國動(dòng)物衛生與流行病學(xué)中心(國家外來(lái)動(dòng)物疫病研究中心)研究確定的非洲豬瘟檢測方法開(kāi)展檢測工作,所需診斷程序、引物等由動(dòng)衛中心統一提供。任何單位均不得違規生產(chǎn)、銷(xiāo)售非洲豬瘟診斷制劑,沒(méi)有相關(guān)資質(zhì)的實(shí)驗室也不得開(kāi)展非洲豬瘟診斷工作。

9、防控

目前世界范圍內尚無(wú)有效疫苗預防非洲豬瘟,市面上更沒(méi)有合法生產(chǎn)、銷(xiāo)售的疫苗。所以在該病的防控上,要做到:

加強領(lǐng)導,密切配合,依靠科學(xué),依法防治,群防群控,果斷處置。到達:及時(shí)發(fā)現,快速反應,嚴格處置,減少損失的目標。重點(diǎn)要做好日常的生物安全管理和臨床巡視、診斷。非洲豬瘟病死率高達100%,無(wú)有效治療手段,一旦發(fā)病,必須按照農業(yè)農村部印發(fā)的《非洲豬瘟疫情應急預案》和《非洲豬瘟防治技術(shù)規范(試行)》進(jìn)行封鎖、撲殺等措施,不得進(jìn)行治療。

9.1 在國家層面上,把好國門(mén),嚴格出入境檢驗檢疫。防止新病原的傳入。8月3日22時(shí),海關(guān)總署公布《關(guān)于加強非洲豬瘟疫情防控工作的警示通報》,有效期6個(gè)月。具體要求如下:

(1)要加強供港澳活豬管理,指導相關(guān)養殖場(chǎng)做好防范工作,特別是疫情周邊地區,要高度關(guān)注豬異常發(fā)病死亡等情況,抓好疫情報告、采樣送檢等工作,嚴格按照防控要求,科學(xué)有效穩妥處置。

(2)要加強對來(lái)自非洲豬瘟疫區國家(地區)的進(jìn)境寄遞物和旅客攜帶物查驗,一旦發(fā)現豬、野豬及其產(chǎn)品,一律作退回或銷(xiāo)毀處理。

(3)要針對性研究制定非洲豬瘟疫情應急處置預案,加強人員培訓和應急綜合演練,提高一線(xiàn)海關(guān)關(guān)員對突發(fā)疫情的早期報告、鑒別診斷和規范應對能力。

(4)在途經(jīng)我國或在我國停留的國際航行船舶、汽車(chē)、飛機和火車(chē)等運輸工具上,如發(fā)現有來(lái)自非洲豬瘟疫區國家(地區)的豬、野豬及其相關(guān)產(chǎn)品,一律做封存處理。其廢棄物、泔水等一律在海關(guān)的監督下做無(wú)害化處理。

(5)密切關(guān)注境內外疫情動(dòng)態(tài),做好信息收集工作,發(fā)現問(wèn)題及時(shí)報送海關(guān)總署動(dòng)植司。

9.2 在國內防止疫情的擴散,嚴格遵循《動(dòng)物防疫法》《重大動(dòng)物疫情應急條例》《國家突發(fā)重大動(dòng)物疫情應急預案》《非洲豬瘟防治技術(shù)規范》和《非洲豬瘟疫情應急預案》等法律法規,全面監測國內疫情,規范疑似疫情的報告、確診程序,緊急開(kāi)展流行病學(xué)的調查,做好疫情的處置,包括及時(shí)對疫點(diǎn)、疫區和受威脅區的劃定和封鎖,對疫點(diǎn)、疫區內所有存欄生豬的撲殺和無(wú)害化處理,對疫點(diǎn)、疫區和受威脅區進(jìn)行全面徹底消毒等,禁止疫區內生豬的調運。對基層專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行培訓,包括生豬的撲殺和無(wú)害化處理、不同場(chǎng)景的消毒、樣品的采集和保存運輸等技術(shù)。加強宣傳,非洲豬瘟只感染豬,對人和其他動(dòng)物沒(méi)有威脅,所以對待疫情既要高度重視,也不要引起不必要的恐慌。

9.3 在養豬場(chǎng)層面,做好嚴格的生物安全措施:嚴格控制人員、車(chē)輛和易感動(dòng)物進(jìn)入養殖場(chǎng);進(jìn)出養殖場(chǎng)及其生產(chǎn)區的人員、車(chē)輛、物品要嚴格落實(shí)消毒等措施。盡可能封閉飼養生豬,采取隔離防護措施,盡量避免與野豬、鈍緣軟蜱接觸。嚴禁使用泔水或餐余垃圾飼喂生豬。積極配合當地動(dòng)物疫病預防控制機構開(kāi)展疫病監測排查,特別是發(fā)生豬瘟疫苗免疫失敗、不明原因死亡等現象,應及時(shí)上報當地獸醫部門(mén)。

10、疫苗進(jìn)展

10.1滅活疫苗

迄今為止, 采用多種傳統方法制備的非洲豬瘟滅活疫苗均不能對強毒攻擊提供有效的免疫保護, 包括病毒接種肺泡巨噬細胞以及感染脾組織后勻漿制備的滅活疫苗。雖然用非洲豬瘟滅活疫苗免疫后可產(chǎn)生高效價(jià)的抗體, 但難以檢測到中和抗體的存在。提示細胞免疫在A(yíng)SF疫苗免疫保護中起重要作用。鑒于現有研究結果, 采用傳統方法研制有效的非洲豬瘟滅活疫苗困難較大。

10.2減毒活疫苗

根據減毒活疫苗毒株來(lái)源不同, 可將非洲豬瘟減毒活疫苗毒株分為3類(lèi):傳代致弱毒株、天然致弱毒株和重組致弱毒株。減毒活疫苗能夠誘導強烈持久的免疫應答, 但生物安全是其使用的主要限制因素,采用分子生物學(xué)手段可增強減毒活疫苗的安全性。

10.2.1傳代致弱毒株

非洲豬瘟病毒可經(jīng)過(guò)豬骨髓來(lái)源細胞、Vero和COS-1等細胞系傳代致弱。傳代過(guò)程中, 非洲豬瘟病毒致病力逐漸下降, 同時(shí)病毒免疫原性和穩定性也隨之下降。由于生物安全原因,傳代致弱毒株的致病性導致此類(lèi)疫苗的開(kāi)發(fā)一度受阻。家豬接種完全致弱的ASFV-G毒株后并未獲得相應保護力, 以抵抗母本病毒的攻擊, 表明傳代致弱的非洲豬瘟病毒安全性較差且很難提供較好免疫保護。

10.2.2 天然致弱毒株

采用天然致弱非洲豬瘟病毒毒株OURT88/3或NH/P68免疫動(dòng)物后, 能誘導產(chǎn)生對同源強毒株的攻毒保護, 保護率介于66%~100%。研究表明, 病毒特異性抗體以及CD8+T細胞在免疫保護中均起重要作用, 且OURT88/3毒株產(chǎn)生的免疫保護與病毒特異性IFN-γ產(chǎn)生細胞呈正相關(guān)性。采用NH/P68免疫后, 豬對高毒力ASFV/L60感染抵抗力增強。以OURT88/3免疫并用致病性OURT88/1毒株進(jìn)行加強免疫后, 可誘導機體產(chǎn)生針對非洲豬瘟病毒 I型不同分離毒株的交叉保護, 表明研制具有交叉保護的非洲豬瘟病毒疫苗是可能的。然而, 天然致弱毒株免疫動(dòng)物后可造成諸多副反應, 包括肺炎、流產(chǎn)和死亡等,以及存在散毒的可能性等生物安全隱患限制了其在實(shí)際生產(chǎn)中的進(jìn)一步應用。

10.2.3 重組致弱毒株

采用分子生物學(xué)方法, 敲除病毒功能基因、病毒毒力基因或者免疫抑制基因, 可降低病毒毒力或增加機體對病毒的免疫應答, 研制比傳統弱毒疫苗安全性更好且效力更高的基因工程減毒活疫苗。研究表明, 一些缺失某些基因的毒株接種宿主,毒力減弱且可誘導產(chǎn)生針對同源母本毒株或異源毒株的特異性免疫保護。

安全性和有效性是影響非洲豬瘟弱毒活疫苗田間應用的重要因素,致弱毒株保護性的強弱、是否有毒力殘留和是否導致持續感染是弱毒活毒株能否成為候選疫苗毒株的重要決定因素。因此, 還需要進(jìn)一步研究以確定適合的缺失靶基因及其組合, 以研制可誘導保護性免疫反應且沒(méi)有相應副作用的非洲豬瘟病毒弱毒活疫苗。

10.3病毒活載體疫苗

研究表明, 細胞免疫和體液免疫在抗非洲豬瘟病毒感染中發(fā)揮作用。有學(xué)者將非洲豬瘟病毒保護性抗原重組入腺病毒或痘病毒載體,獲得了良好的抗原特異性CTL反應,能夠誘導強烈體液免疫反應和細胞免疫應答,但上述研究仍需通過(guò)攻毒保護試驗, 進(jìn)一步驗證病毒活載體疫苗在非洲豬瘟疫苗開(kāi)發(fā)中的可行性。

10.4核酸疫苗

非洲豬瘟核酸疫苗的研究剛剛起步, 通過(guò)將編碼病毒主要抗原的基因克隆入真核表達載體后, 直接導入機體內, 在宿主細胞內完成轉錄翻譯后產(chǎn)生抗原蛋白, 從而同時(shí)激活體液免疫和細胞免疫應答。實(shí)驗接種非洲豬瘟 DNA疫苗后, 在沒(méi)有誘導產(chǎn)生可檢測水平非洲豬瘟病毒抗體的情況下, 能夠使部分動(dòng)物獲得攻毒免疫保護, 表明細胞免疫在非洲豬瘟病毒疫苗的免疫中起重要作用。

10.5亞單位疫苗

非洲豬瘟亞單位疫苗只包含特定的病毒抗原, 需通過(guò)合適抗原傳遞系統免疫動(dòng)物。用重組p30或p54蛋白免疫豬后可以誘導中和抗體的產(chǎn)生, 但不能提供針對急性非洲豬瘟感染的保護,但同時(shí)免疫p30和p54蛋白或兩種蛋白的嵌合體可以提供部分保護。用桿狀病毒表達系統制備的非洲豬瘟病毒結構蛋白p72、p30和p54等, 以蛋白復合物作為抗原免疫動(dòng)物后仍不能提供有效的免疫攻毒保護, 說(shuō)明僅僅依靠上述抗原刺激產(chǎn)生的中和抗體很難獲得理想的免疫保護效果。因此, 需要研究鑒定更多的非洲豬瘟病毒保護性抗原、開(kāi)發(fā)新型免疫佐劑以及采用DNA首免蛋白質(zhì)加強免疫策略, 以提高非洲豬瘟基因工程亞單位疫苗的免疫效力。

10.6疫苗展望

我國已發(fā)生非洲豬瘟疫情,研發(fā)安全有效非洲豬瘟疫苗也迫在眉睫。過(guò)去的幾十年中, 對非洲豬瘟疫苗的研究雖取得了較大進(jìn)展,但是所有努力都未能研制出可應用于實(shí)際生產(chǎn)的疫苗。通過(guò)基因重組技術(shù), 獲得安全、高效減毒活疫苗仍是非洲豬瘟病毒疫苗開(kāi)發(fā)的首選策略。然而, 仍有很多問(wèn)題需要考慮, 如安全性研究, 以及開(kāi)發(fā)適合弱毒活疫苗生產(chǎn)的細胞系等。研發(fā)可鑒別野毒感染和疫苗免疫的非洲豬瘟亞單位疫苗、病毒活載體疫苗、核酸疫苗、以及復制缺陷型疫苗也是研發(fā)非洲豬瘟病毒疫苗的重要策略, 尤其是在沒(méi)有疫病流行地區的使用。與減毒活疫苗相比, 這些疫苗的生物安全性有所提高, 但鑒定病毒保護性抗原, 有效的遞送機制以及高效的免疫佐劑都需要長(cháng)期的研究和探索,正所謂任重而道遠。

11、結語(yǔ)

這次的非洲豬瘟,可說(shuō)是來(lái)勢洶洶,三周時(shí)間內就發(fā)現4宗病例,沈陽(yáng)非洲豬瘟疫情的發(fā)生,宣告了中國非洲豬瘟零疫情歷史的結束。疫情的發(fā)生,既是意料之外也是意料之中,因為我們早就認識到我國周邊國家的疫情會(huì )對我國造成較大的威脅,隨著(zhù)國際貿易和旅游的日益增多,生豬和肉品的大量走私,威脅隨著(zhù)增大。我國對非洲豬瘟早有防范,自該病2007年傳入俄羅斯以來(lái),農業(yè)農村部先后印發(fā)了《非洲豬瘟防治技術(shù)規范(試行)》和《非洲豬瘟疫情應急預案》,在北方邊境省份等高風(fēng)險地區多次組織開(kāi)展應急演練,并連續多年在全國范圍內開(kāi)展監測,定期及時(shí)通報國際上非洲豬瘟的流行動(dòng)態(tài)。今年5月7日,海關(guān)總署與農業(yè)農村部還聯(lián)合發(fā)布關(guān)于防止匈牙利非洲豬瘟傳入我國的公告,禁止直接或間接從匈牙利輸入豬、野豬及其相關(guān)產(chǎn)品。

在目前對病原的來(lái)源、流行病學(xué)不清晰的情況下。為防止疫情擴散,必須加強領(lǐng)導,密切配合,形成多部門(mén)聯(lián)動(dòng)機制,依靠科學(xué),依法防治,群防群控,果斷處置,建立多道防線(xiàn)和多級屏障。做到及時(shí)發(fā)現,快速反應,嚴格處置,減少損失。把疫情控制在最小范圍內、最短時(shí)間內撲滅。